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腫瘤細胞自噬出現的時間與強度

腫瘤細胞自噬作為一項真核生物*的生理現象,開始應用于不同的領域。澳大利亞學者通過對果蠅自噬信號通路中上下游基因的敲除,確定了自噬在果蠅程序性清除中腸中的重要作用。自噬與癌癥之間的一直是眾多學者關注的焦點,美國學者通過在小鼠中突變自噬上游調節基因beclin1,證實當beclin1為雜合子時,小鼠體內的腫瘤增長更迅速,過表達beclin1則會抑制腫瘤的生長。這些研究闡明了自噬的新功能,開辟了新的研究方向,也給了我們將自噬運用于低溫脅迫研究的靈感。本文對自噬的特異基因LC3進行標...

原代細胞保持Z佳狀態的方法

隨著原代細胞機體衰老，血液干細胞也并不太會*地發揮自身的功能了，這就會導致65歲以上的人群機體抵御感染疾病的能力下降，同時還會增加這些人群患血液癌癥的風險。老年人通常并不適合進行骨髓移植用來治療多種血液疾病，這是因為骨髓移植會給老年人帶來較高程度的并發癥風險，在一個成年人體內一般有充足的干細胞來重建造血系統，但對于老年人而言這種功能或許非常受限，因此支持血液干細胞恢復的策略或許就能幫助擴大骨髓移植受體患者的范圍。因此，并不像是單純的管道系統，我們可以將血管細胞視為沿著自行車賽...

原代細胞核心成分

原代細胞核接頭蛋白LDB1是多蛋白轉錄復合體中的一個核心成分。Li等研究發現,在小鼠胚胎和成體造血干細胞中LDB1起到關鍵作用。在造血干細胞和前體細胞中敲除該基因會造成一些維持多能性相關基因的轉錄下調,ChIP-Seq結果顯示,LDB1形成的復合體結合在這些基因的啟動子區域,暗示LDB1維持造血干細胞中起核心作用。多能造血前體細胞是一種干細胞樣細胞,表達各種基因,且有分化成包括免疫系統細胞在內的大量不同類型血細胞的能力。Zhang等利用ChIPSeq和RNA-seq技術在小鼠...

腫瘤細胞轉染要素

腫瘤細胞使用瞬時轉染來蛋白瞬時轉染表達蛋白以往為了獲得蛋白質的高表達產量，必須先轉染細胞，然后挑選一個穩定的轉染細胞系進行蛋白的擴增和富集。而挑選這樣一個細胞系往往需要花費數周甚至數月的時間，這既可能是由于試劑的細胞毒性也可能是由于轉染的低效率。如果是因為轉染試劑具有細胞毒性，那么只有少數細胞能夠存活，從而導致蛋白質的產量很低。而如果是因為轉染成功的細胞太少，那么那些未轉染的細胞生長速度大大超過轉染成功的細胞，其結果同樣也只能產生少量的目標蛋白。使用一種溫和的可以轉染大多數細...

原代細胞的四大特點

1、生命的起源原代細胞人體起源一個單細胞受精卵(*代干細胞)，經歷卵裂(干細胞持續擴增，增加細胞數量)、胚層出現(干細胞開始分化出功能細胞)、組織器官形成(功能細胞的有序排列)及胚后發育這樣一個連續過程。2、維持人體動態平衡的種子細胞人體通過干細胞增殖和分化來實現細胞更新。成年并不意味著細胞增殖和細胞分化的結束，而仍然存在著受調控的組織更新過程。在一些組織中，如骨髓、表皮等，新細胞可不斷地產生，以補充因分化而衰老、死亡的細胞。干細胞的增殖保持著機體內細胞的動態平衡。3、干細胞...

勿怕原代細胞消化過度

對于初學者而言，養原代細胞就像養孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養不好，就越是經常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環境。你跑去看細胞，培養瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經常可以看到新手一天到晚都在看細胞，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長。在傳代的時候，初學者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細...

細胞株是否會受到免疫排斥

研究人員發現相對于細胞株形成的畸胎瘤，由iPS形成的畸胎瘤中的某些基因呈高水平表達。其中的Zg16及Hormad1兩個基因的異常表達可直接導致遭受特異的免疫攻擊。研究人員表示這些基因在正常情況下處于關閉狀態直至胚胎開始對自身組織形成免疫耐受為止，如此就能確保它們不會被宿主所識別。而iPS的重編程程序有可能改變了這些基因的正常表達。長久以來，科學家們在開展iPS研究的過程中把iPS衍生獲得的終末分化細胞例如神經細胞或心肌細胞移植到小鼠體內，證實它們不會引起免疫排斥（但事實上其中...

何促進原代細胞生長并抑制分化？

原代細胞為了保持hESC存活且具有多能性，研究人員通常在滋養層細胞（也就是一層小鼠胚胎成纖維細胞）上培養，或者在微載體上成簇培養。但是在這些基質上培養干細胞是相當昂貴的，而且培養物不能在很長時間內保持未分化狀態，盡管所有必需的生長因子都存在。這種培養基能夠在無滋養層的條件下長時間維持神經細胞的生長和正常表型。在研究過程中，研究人員注意到并非所有細胞都分化了。他們懷疑是培養基的選擇導致了這種現象，于是他們開始集中精力研究培養基如何促進干細胞生長并抑制分化。使用這種新的培養基，研...