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保持原代細胞其多能性的蛋白質的方法

蛋白質Tet能幫助原代細胞保持多能性。Zhang研究組分析了Tet1在整個小鼠胚胎干細胞基因組中的存留時間。他們發現Tet1采用雙管齊下的辦法維持小鼠胚胎干細胞的狀態。一方面，Tet1可對分化起重要作用的基因保持"沉默"；另一方面Tet1也可激活多能性基因。研究組著重于研究Tet1催化反應產物-5羥甲基胞/嘧啶。5羥甲基胞嘧啶是胞嘧啶的修改版-C在四個主要的DNA堿基：A、T、G、C。5羥甲基胞嘧啶和5甲基胞嘧啶分別被稱為是DNA第五、第六個堿基，但是5羥甲基胞嘧啶是zui近...

如何判斷原代細胞污染了？

狀態1：原代細胞培養液變渾濁了，經常見到是米湯樣，黃色液體，一般認為細菌污染。狀態2：細胞培養基內含有能動的小黑點，一般認為是黑膠蟲。狀態3：胞培養基清亮，但是能看到飄在培養液帶有毛毛的白色的菌狀物質，有可能就是真菌感染。策略：細胞污染了就直接扔了，還得把培養箱用酒精棉球擦干凈，并用紫外照射半小時，防止再次污染。同時建議細胞培養時，在培養基中加入青鏈霉素(尤其是初學者)細胞培養過程中，細胞周圍包括細胞上有很多小黑點，怎么辦?策略1：用胰酶消化下來后，低速短時間離心，不同實驗室...

腫瘤細胞活力評估難度低

傳統的腫瘤細胞培養主要是通過顯微鏡下形態學變化以及傳代培養周期的變化預估細胞生長生存狀態。這種主觀判斷既無法量化，也無法進行統計學分析。因此，目前對細胞存活質量的判斷并沒有準確、客觀的統一標準，并且對體外培養細胞的存活質量控制往往被科研工作者們“忽略”，從而導致實驗結果的不穩定。體外細胞的有效培養新概念——“細胞質控”。通過細胞活力、細胞凋亡、細胞周期、細胞增殖及DNA損傷五方面對細胞生長生存狀態進行的監控。在這五個方面中，影響zui大的便是細胞活力，下面咱們專門來談一談細胞...

原代細胞中的核糖核酸可分為哪些種類？

根據原代細胞結構和功能的不同，細胞中的RNA可分為三類：即信使（mRNA）、轉運RNA（tRNA）和核糖體RNA（rRNA）。mRNA以DNA為模板，在RNA聚合酶的催化下，按堿基互補原則，從分子的5，末端向3，末端方向在細胞核內合成，因此，mRNA分子能準確地傳遞DNA鏈上的遺傳信息。合成后的mRNA經核孔進入細胞質，并與核糖體結合，將單核糖體連成多核糖體。由于細胞內的基因和基因組很多，而mRNA是根據要表達的基因或基因組合成的，因此mRNA種類復雜多樣。tRNA是RNA中...

原代細胞培養新技巧

研究人員發現了一個能提高人類原代細胞，以及誘導多能干細胞iPS三倍數量的新方法，而且這種方法還無需一般培養方法中都需要的小鼠飼養細胞。胚胎干細胞和iPS細胞由于其杰出的再生能力，吸引了眾多科學家，這些多能干細胞是許多疾病的新希望，比如帕金森癥，阿茲海默癥等，也是篩選信號的新方向，同時這些細胞還能為糖尿病，神經或其它組織損傷提供移植治療細胞。但是這些技術應用需要百萬，甚至千萬的細胞，目前的培養方法無法達到這一需求。而的這篇文章在之前研究的基礎上——幫助研究人員了解了*的表面化合...

如何對原代細胞進行保存和培養？

原代細胞形成的單層細胞匯合以后，需要進行分離培養，否則細胞會因生成空間不足或由于細胞密度過大引起營養枯竭，都將影響細胞的生長，這一程序常稱為傳代或傳代培養。原代培養在傳代時即為細胞系，能連續培養下去的為連續細胞系；不能連續培養的為有限細胞系。通常，傳代培養是指擴大培養，也就是將一份細胞一分為二或者一分為三進行培養等。但嚴格說來，不論稀釋與否，將細胞從一個培養瓶轉移或移植到另一個培養瓶即稱為傳代或傳代培養。可以理解，在任何時候，細胞從一個瓶子接種到另一個瓶子時總會丟失一部分，因...

腫瘤細胞增殖檢測：3H同位素滲入法實例

一、原理腫瘤細胞在有絲分裂原PHA、ConA等的刺激下，產生增殖反應，DNA和RNA合成明顯增加，如在培養液中加入3H－胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），則可被轉化中的細胞攝入。測定標記淋巴細胞的放射強度可反映淋巴細胞增殖的程度。二、儀器和材料RPMI-1640細胞培養液、小牛血清、2-巰基乙醇（2-ME）、青霉素、鏈霉素、刀豆蛋白A（ConA）、Hank's液、PBS緩沖液（pH7.2-7.4）、3H-TdR、閃爍液[2，5-二苯基惡唑（PPO）0.5g、1，4-雙-（5-苯基...

細胞株雙重效果

在細胞株早期的研究中，SohailTavazoie實驗室已研究了一個被稱作ApoE的基因及其在抑制黑色素瘤從它的原發性部位擴散到其他器官中的作用。他們已發現增加ApoE表達通過破壞癌細胞浸潤健康組織和長出血管的能力來導致下降的腫瘤轉移。當這些研究人員發現了激活ApoE表達的藥物在那些具有健康免疫系統的小鼠中比在那些沒有健康免疫系統的小鼠中能夠更加有效時，事情就開始變得更加有趣了。除了抗腫瘤轉移作用之外，這些藥物似乎通過降低這些小鼠中的MDSC水平來影響免疫反應，并因此激活抗腫...