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原代細胞培養的起源

原代細胞是在標準條件下用有限或連續細胞系開展工作的.所以,考慮培養物中的細胞成分非常重要.如細胞在誘導條件下表現分化特征,要么意味著培養的細胞是成熟的,保持其持續合成特殊蛋白質的能力就夠了;要么意味著培養細胞由前體細胞或干細胞組成,這些細胞有增殖能力,美工維持未分化狀態,當有了合適的誘導條件,其中的一些或全部細胞會成熟并分化.有指導意義的考慮是,把培養物看成是由多能干細胞,未分化的定向前體細胞和成熟細胞組成的平衡狀態,并且,這種平衡可隨環境條件變化而改變.在細胞密度較低的情況...

原代細胞新打印技術存活率高

研究人員開發出一種可將原代細胞打印到任何表面和幾乎任何形狀上的技術，且整個過程中幾乎所有的細胞仍能存活。新技術猶如中國古代木刻版印刷術和現在兒童橡皮印章玩具，與噴墨打印方法有所不同。這種方法在短短半個小時內可產生2D細胞陣列，打印出的細胞緊密到接近5微米（大多數動物細胞在10到30微米寬），并允許使用許多不同類型的細胞。研究人員將這種技術命名為批量細胞打印（BloC打印）。噴墨打印方法打印二維和三維細胞已基本成功，但有時只有一半細胞在打印過程中存活。秦立冬說：“基于噴墨的細胞...

原代細胞分析之全攻略

原代細胞轉錄組學和蛋白質組學NanoStringTechnologies的科學家發現，細胞群體的RNA平均表達水平不一定與群體中單個細胞的RNA表達相同。例如，有些基因持續在低水平表達，而另一些則在短時間內大量表達。對宏觀測定而言，這樣的表達模式被平均化。該公司*的數字表達譜分析系統能直接對單個RNA分析進行計數，zui多可分析單細胞中的800個不同分子。這是利用nCounterSingleCellGeneExpressionAssay中的分子條形碼來實現的，它識別特定的RN...

避免污染的原代細胞培養方法

培養原代細胞常規方法需用二氧化碳溫箱，且為保持箱內二氧化碳氣5%～10%的濃度，需持續輸入二氧化碳氣體。為此，箱內的培養瓶蓋不能擰緊以便二氧化碳氣體自由進出。*步，配制1L培養液。培養基中含有酚紅指示劑，偏堿時液體為深紅或紫色，偏酸時則呈黃色。取配1L培養液的粉劑培養基，加入750ml三蒸水或去離子水，搖勻(一般培養液呈橘紅色)；再加入碳酸氫鈉1～1．1g，至*溶解(呈深紅色)；zui后再加三蒸水或去離子水至1L止。第二步，插吸管于配好的培養液內，通入二氧化碳氣體。隨著二氧化...

原代細胞被支原體污染的危害

為什么有些原代細胞實驗無法重復？為什么有的細胞在相當長的時間里，都養不到好的狀態？為什么實驗室中，超過一株以上的細胞都時好時壞？細胞生長緩慢、細胞變形、碎片增加、懸浮細胞容易成團、培養基提前變色、鏡下發現有小黑點……如果排除了其他試劑選擇不當、細胞株老化、細菌污染等原因，而仍有上述一種或幾種情況，則高度提示——你的細胞可能被支原體污染了！支原體污染普遍存在據美國數據統計，細胞發生支原體污染的幾率在70%以上。同時，由于支原體直徑很小，僅在180nm~350nm之間，只有通過電...

細胞株污染的清除

培養細胞株一經污染，多數較難處理。如果污染細胞價值不大，宜棄之;在尋找原因后*消毒操作室，復蘇或重新購置細胞，再培養。若污染細胞價值較大，又難于重新得到，可采取以下辦法清除。一、細菌和真菌的清除1、使用抗生素抗生素對殺滅細菌較有效。聯合用藥比單獨用藥效果好。預防用藥比污染后再用藥效果好。預防用藥一般用雙抗生素，污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時，再換常規培養液。此法在污染早期有效。二、支原體的清除1、用MRA處理用MRA(Mycopl...

細胞株增殖實驗服務

細胞株增殖是生物體生長、發育、繁殖、遺傳的基礎，是細胞zui基本的生理活動。生長因子、激素及癌基因產物等均可誘導細胞的增殖或抑制細胞的增殖，通過影響細胞周期、誘導細胞凋亡而實現。MTT檢測細胞增殖MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide。MTT比色法是常用的檢測細胞存活和生長的方法之一，其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚并沉積在細...

細胞株狀態不好的解決方法

細胞株是生物體形態結構和生命活動的基本單位。通常認為細胞是人體的zui小單位，它是由許多更小的具有自身功能的結構組成。盡管人類細胞大小不等，但所有的細胞均很小。即使是zui大的細胞如受精卵，也是肉眼所不能見到的。細胞狀態不好，可能是血清中有黑膠蟲。解決方法如下：1.換好一點的血清。2.用無菌的PBS洗幾次，可一定程度上緩解。注意好實驗環境要，保持細胞間整個環境的潔凈度。3.換用進口的一次性塑料培養瓶。4.建議清理無菌室所有物品，重新滅菌，用KMnO4熏蒸，按使用無菌室做，細胞...