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ARTICLES細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
產品名稱:大鼠腸靜脈內皮細胞*培養基
規格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10141
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養基;優質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
AChRab ELISA Kit 大鼠乙酰膽堿受體抗體Multi-class antibodies規格: 48T
XBP-1 細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh G alpha gust Gα gust抗體 規格 0.2ml
IGF-1(Human insulin-like growth factors 1) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子1 96T
NF-ATc4 英文名稱: T細胞激活核轉錄因子4抗體 0.1ml
APPBP1 英文名稱: β淀粉樣蛋白前體蛋白結合蛋白1抗體 0.2ml
XBP-1 細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
PDGF-AB 大鼠血小板衍生生長因子Multi-class antibodies規格: 48T
Phospho-EGFR(Ser1046/1047) 磷酸化表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Myoglobin 肌紅蛋白抗體 規格 0.1ml
HB- Beta(Human Beta-subunits of hemoglobin) ELISA Kit 人血紅蛋白β亞基 96T
SLC10A1 英文名稱: 鈉離子/磺膽酸共轉運蛋白抗體 0.1ml
(C2F1) 英文名稱: 單克隆抗體 0.1ml
Phospho-EGFR(Ser1046/1047) 磷酸化表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Goat Chicken IgG/RBITC 羅丹明標記的羊抗雞IgG 0.3ml
phospho-FABP4 (Tyr20) 英文名稱: 磷酸化脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白 0.1ml
細胞凋亡抑制因子5抗體 BIRC5/Survivin variant 0.1ml
NKB/FITC 熒光素標記神經激肽 B抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PPIG 親環蛋白(親環素)PPIG抗體 規格 0.2ml
Il-7R a(CD127)/RBITC 羅丹明標記白細胞介素-7受體a抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
大鼠腸靜脈內皮細胞*培養基組織3-羥-3-甲戊二酰A(HMG-COA)還原酶活性直接比色法20次兔尿酶型纖溶酶原活物受體(PLAUR/uPAR)Elisa測定試劑盒
定量檢測試劑盒兔抗平滑肌抗體(ASMA) Elisa測定試劑盒
血液3-羥-3-甲戊二酰A(HMG-COA)還原酶活性直接比色法20次兔子間粘附分子3(ICAM-3/CD50)Elisa測定試劑盒
定量檢測試劑盒骨形態發生蛋白-2抗體流式組化
細胞3-羥-3-甲戊二酰A(HMG-COA)還原酶活性間接比色法20次成纖維生長因子受體2抗體流式組化
定量檢測試劑盒L-鳥乙酯鹽酸鹽
組織3-羥-3-甲戊二酰A(HMG-COA)還原酶活性間接比色法20次L-胱鹽酸鹽
定量檢測試劑盒15-150kDa精確分子量MARK
血液3-羥-3-甲戊二酰A(HMG-COA)還原酶活性間接比色法20次5-胞苷三磷酸二鈉鹽
定量檢測試劑盒5-鳥苷二磷酸二鈉鹽
3-羥-3-甲戊二酰A(HMG-COA)還原酶待測樣品制備試劑盒20次2′-脫氧胞苷
通用型蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測試劑盒20次山梨酸
細胞蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測試劑盒20次蘇丹Ⅱ
組織蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測試劑盒20次7B
血液蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測試劑盒20次1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亞
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