細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：肺扁平上皮癌細(xì)胞;QG-56

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9923

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

VEGF-B/FITC 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CD82/KAI1 peptide 轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CD38抗體(人)  CD38 0.1ml

Substance P 英文名稱： P物質(zhì)抗體 0.1ml

EIF5 英文名稱： 真核翻譯起始因子5抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Gria2 (Ser880) 磷酸化谷受體2抗體 規(guī)格 0.1ml

CD82/KAI1 peptide 轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

IL-10 ELISA KIT 大鼠白介素-10Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 DDB2 損傷DNA結(jié)合蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NEDD4 神經(jīng)前體細(xì)胞發(fā)育下調(diào)蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml

Human Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit 人白血病抑制因子 96T

TBCE 英文名稱： 微管蛋白特定伴侶蛋白E抗體 0.2ml

Carbonic anhydrase 3 英文名稱： 碳酸酐酶3抗體 0.2ml

 DDB2 損傷DNA結(jié)合蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Donkey  Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml

FGF1 英文名稱： 酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 0.1ml

大腸埃希桿菌O抗體  EPEC-IgG O 0.2ml

 PEA15/FITC 熒光素標(biāo)記星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr181) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

rec Protein A/FITC 熒光素標(biāo)記重組純化蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
肺扁平上皮癌細(xì)胞;QG-56凍切片組織P27蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人普通急性白血病抗原（CALLA）ELISA試劑盒, CALLA ELISA kit

石蠟切片組織P27蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白（Bid）ELISA試劑盒,Bid ELISA kit

載玻片細(xì)胞P27蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人α1抗胰糜蛋白酶（AACT）ELISA試劑盒,AACT ELISA kit

凍切片組織P27蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人低密度脂蛋白（LDL）ELISA試劑盒,LDL ELISA

石蠟切片組織P27蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人可溶性核因子κB受體活化因子配基（sRANKL）ELISA試劑盒,sRANKL ELISA

細(xì)胞P27蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒10/50 次人血紅素氧合酶1（HO-1）ELISA試劑盒,

細(xì)胞P27蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒10/50 次人蛋白酶3特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體（PR3-ANCA）ELISA試劑盒,

P27蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒5次人金葡菌腸素（SE）ELISA試劑盒,

P27蛋白共沉淀分析試劑盒5次人堿性胎兒蛋白（BFP）ELISA試劑盒,

P27蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25次小鼠17羥皮質(zhì)類固醇（17-OHCS）ELISA試劑盒,

細(xì)胞P35蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20次小鼠白介素6（IL-6）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞P35蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶活肽（PACAP）ELISA試劑盒,

凍切片組織P35蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次小鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子（TGSF）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織P35蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次小鼠β葡萄糖醛酸苷酶（βGD）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞P35蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次小鼠促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒,