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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心天然蛋白、重組蛋白重組蛋白/RP高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白

高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白
產(chǎn)品簡介

高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:(駱駝痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒大腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒胎兒彎曲桿菌性病亞種探針法熒光定量PCR試劑盒)綿羊皰疹病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒Ovine Herpesvirus 2(OHV-2)1(RT-1、RT-1)禽皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒Avian Herpe

更新時間:2023-03-20
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:225
產(chǎn)品型號:
詳細(xì)介紹在線留言

公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)

HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::分泌, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量:47.2kDa

實際分子量:47kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Gly204~Leu364 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):6.6

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

 

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human STAT5A宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human UBA5宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant SARS-CoV-2 Nucleoprotein-N1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Coronavirus

Recombinant Chicken GH宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Chicken

圖片6.png



標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

HOXD12產(chǎn)品名稱: 同源盒蛋白D12抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep

ZCCHC6產(chǎn)品名稱: ZCCHC6蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Rabbit

Lin28產(chǎn)品名稱: RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

CD73產(chǎn)品名稱: CD73抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig

HSP90 alpha產(chǎn)品名稱: 熱休克蛋白90α單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

CAMKK2產(chǎn)品名稱: 鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep

EFCAB4B產(chǎn)品名稱: EFCAB4B蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit, GuineaPig

SHISA7產(chǎn)品名稱: SHISA7蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep

ITGAV產(chǎn)品名稱: 整合素αV(CD51)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

Paxillin產(chǎn)品名稱: 樁蛋白Paxillin抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白人組織因子(TF)ELISA試劑盒TF組織因子elisa酶聯(lián)免疫試劑盒Human Tissue factor,IF ELISA Kit

人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)ELISA試劑盒MICA組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因Aelisa檢測試劑盒Human major histocompatibility complex class I chain-related gene A,MICA ELISA Kit

人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)ELISA試劑盒H2-K1組織相容性2-K1-K 區(qū)elisa kithuman Histocompatibility 2-K1-K region,H2-K1 ELISA Kit

人組織多肽特異性抗原(TPS)ELISA試劑盒TPS組織多肽特異性抗原ELISA試劑盒Human tissue polypeptide specific antigen,TPS ELISA Kit

人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒Cath Ab組織蛋白酶抗體elisa酶聯(lián)免疫試劑盒Human Cathepsin Antibodies,Cath Ab ELISA Kit
操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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