產(chǎn)品名稱：腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10007

細(xì)胞生長實驗 ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
Regucalcin/SMP30/Rgn/FITC 熒光素標(biāo)記衰老標(biāo)記蛋白30抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Bursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽Multi-class antibodies規(guī)格： 100mg

抗蚯溶酶抗體/抗激酶抗體  Lumbrokinase 0.1ml

Selenium Binding Protein 1 英文名稱： 硒結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml

FOXB1 + FOXB2 英文名稱： 叉頭蛋白B1+B2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PKC gamma (Thr514) 磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體 規(guī)格 0.1ml

Bursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽Multi-class antibodies規(guī)格： 100mg

IL-3 小鼠白介素-3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 EPOR 紅細(xì)胞生成素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh mTOR/FRAP 雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

CCP(Human complement control protein) ELISA Kit 人補體調(diào)節(jié)蛋白 96T

STOM 英文名稱： 紅細(xì)胞膜蛋白STOM抗體 0.2ml

CD11b 英文名稱： 整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體 0.1ml

 EPOR 紅細(xì)胞生成素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Mouse  rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml

FLRT2 英文名稱： 富含亮酸跨膜纖連蛋白2抗體 0.2ml

抗Ⅹ型膠原抗體  CollagenⅩ 0.2ml

 Mtp53/FITC 熒光素標(biāo)記突變型P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PIBF1/C13orf24 孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體 規(guī)格 0.2ml

Goat  Chicken IgG/Biotin 生化羊抗雞IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基人體CYCLIN D1 RFLP基因分析試劑盒20次癸烷磺酸鈉

人體CYP1A2 RFLP基因分析試劑盒20次第威德合金

人體Methyl tetrahydrofolate reductase RFLP基因分析試劑盒20次人神經(jīng)營養(yǎng)因子4（NT-4）ELISA試劑盒,NT-4 ELISA kit

人體Hemoglobin E RFLP基因分析試劑盒20次人黑色素瘤標(biāo)記物（MART/Melan-A）ELISA試劑盒,MART/Melan-A ELISA

人體HLA-DPB1 RFLP基因分析試劑盒20次人轉(zhuǎn)谷氨酰酶2C多肽（TGM2）ELISA試劑盒,TGM2 ELISA kit

人體Interleukin-4-receptor alpha RFLP基因分析試劑盒20次人抗胸腺球蛋白（ATG）ELISA試劑盒, ATG ELISA kit

人體c-Ki-ras RFLP基因分析試劑盒20次人腺病IgG（ADV-IgG）ELISA試劑盒,ADV-IgG ELISA

人體MMP3 RFLP基因分析試劑盒20次人肽釋放酶10（KLK 10）ELISA試劑盒,

人體MMP9 RFLP基因分析試劑盒20次人丙酮酸酶M2型同工酶（M2-PK）ELISA試劑盒,

人體TNF-βRFLP基因分析試劑盒20次人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白（ANG）ELISA試劑盒,

Borrelia burgdorferi RFLP基因分析試劑盒20次人ras同源物基因家族成員b（RHOB）ELISA試劑盒,

Toxoplasma gondii RFLP基因分析試劑盒20次人補體3裂解產(chǎn)物（C3SP）ELISA試劑盒,

Trypanosoma congolense RFLP基因分析試劑盒20次小鼠粘蛋白/粘液素7（MUC7）ELISA試劑盒,

Hepatitis B virus RFLP基因分析試劑盒20次小鼠白介素7（IL-7）ELISA試劑盒,

Human cytomegalovirus （HCMV）RFLP基因分析試劑盒20次大鼠周期素D3（Cyclin-D3）ELISA試劑盒,