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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒50T人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品簡介

人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

更新時間:2020-09-29
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:379
產(chǎn)品型號:50T
詳細(xì)介紹在線留言

實驗過程:
一、人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma hominis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Buddleoside早老素1檢測試劑盒10mg

7,2'-二羥基-3′,4′-二基異黃 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 7,2-Dihydroxy-3,4-Dimethoxyisoflavan

Tripdiolide氨汀標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)Polyclonal Antibody 0.2ml

人腫瘤壞死子可溶性受體I(TNFsRI) BPIL2  殺菌/通透性增加蛋白樣2抗體規(guī)格:96T/48TAmiloride Hydrochloride規(guī)格:2gcJun氨基末端激酶檢測試盒500mg人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系,58F細(xì)胞1x10^6cells

Gallic acid早老素2檢測試劑盒20mg

 酵母粉瓊脂/酵母提取物瓊脂/Yeast Extract Agar水中細(xì)菌總數(shù)的檢測250克國產(chǎn)/進(jìn)口

Celastrol氨汀二硫化物標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人載脂蛋白C1(APO-C1)Polyclonal Antibody 0.2ml

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制子4(TIMP4)BPIL3  殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體規(guī)格:96T/48T規(guī)格:1gClara細(xì)胞分泌蛋白檢測試盒20mg人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞,95D細(xì)胞1x10^6cells

5羧基四基羅丹明(單一化合物)5mg

反式丁(standard for GC) 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC (E)-2-Butenal

AntiMouse IgA Whole serum  兔抗小鼠IgA抗血清*β防御素2檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒4858859

5羧基四基羅丹明(單一化合物)5mg

 神經(jīng)束蛋白(NFASC)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neurofascin (NFASC)

Rabbit Antirat IgG Whole serum  兔抗大鼠IgG抗血清進(jìn)口、分裝生物素檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒4858859

白頭翁皂甙B45羧基四基羅丹明(單一化合物)10mg

十二(Standard for GC,≥99.5% (GC)) 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5% (GC) Dodecane

C.L.E.D Medium250孕烯醇檢測試盒5mg腫瘤壞死子α檢測試盒Interleukin10
人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒白藜蘆;Resveratrol CAS號: 501360 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

白楊素;Chrysin CAS號: 480400 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

阿彼斯姆素;apiosylskimmi CAS號: 103529948 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

澳茄新堿;Solasurine CAS號: 27028768 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

7氨4香素;7aMino CAS號: 26093312 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

9氨喜樹堿;9Aminocampt CAS號: 91421431 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

阿馬堿;Raubasine CAS號: 483045 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢

阿奇;Azithromycin CAS號: 83905015 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢

安格洛苷C;Angoroside C CAS號: 115909223 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

安五脂素;Anwuligan CAS號: 107534930 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

阿卡波糖;Acarbose CAS號: 56180940 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

阿多尼弗林堿; CAS號:  規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢

D阿拉伯糖;Adonito CAS號: 488813 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

艾黃素;Artemisetin CAS號: 479903 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

β桉葉;βEudesmol CAS號: 51317089 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。

 

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