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當前位置:首頁產(chǎn)品中心定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒50T巨睪前殖吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

巨睪前殖吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品簡介

巨睪前殖吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

更新時間:2020-09-30
廠商性質:經(jīng)銷商
訪問量:338
產(chǎn)品型號:50T
詳細介紹在線留言

實驗過程:
一、巨睪前殖吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:巨睪前殖吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Prosthogonimus macrorchis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Ginsenoside Rh2胰島素受體底物1檢測試劑盒5mg

利奧西呱,BAY 63-2521 質量規(guī)格:>98%,可溶性鳥苷環(huán)化酶激 (sGC)活劑 Riociguat

Ginsenoside Rb3n-去基阿奇霉素標準品規(guī)格:規(guī)格:人疑似陽離子轉運ATP酶 13A2(ATP13A2)Polyclonal Antibody 0.2ml

AhR(Human aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit  人芳香烴受體CAS號:1890988淀粉分支酶檢測試盒30KUHuman/人Elisa試盒31364428

Ginsenoside Rh1胰島素受體底物2檢測試劑盒5mg

 三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基/三糖鐵培養(yǎng)基/TSI瓊脂/Triple Sugar Iron Agar腸桿菌科細菌的生化試驗250克國產(chǎn)/進口

促腎上腺皮質激素(ACTH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 VEGF121b / VEGF-A 蛋白*500mL/瓶

SMAF(Human Specifie Macrophage Arming Paetot) ELISA Kit  人特異性巨噬細胞武裝子CAS號:1880366環(huán)氧合酶1檢測試盒2KUHuman/人Elisa試盒31364428

8氨基芘1,3,6三磺三鈉鹽5mg

 III型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL

EXPB2  植物延展素β(抗原)進口、分裝心肌肌漿網(wǎng)鈣泵檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒499081

EDANS 酰5mg

吡螨(標準品) 質量規(guī)格:分析標準品 Tebufenpyrad

factor VIII  第八子相關抗原(多肽片斷抗原)進口、原裝型肝炎病細胞受體1檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒499809

EDANS C2 馬來酰亞5mg

 血瓊脂培養(yǎng)基基礎 規(guī)格: 250g 用途: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10-...

FAS (Apoa1; CD95;)(抗原)  載脂蛋白a1現(xiàn)貨供應溶酶體a甘露糖苷酶I檢測試盒1gHuman/人Elisa試盒499809
巨睪前殖吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒去氧姜黃素 CAS號: 24939171 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

姜黃素 CAS號: 458377 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

 CAS號: 71963774 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

槲皮苷 CAS號: 522123 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

槲皮素 CAS號: 117395 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

花旗松素;二槲皮素 CAS號: 480182 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

槐果堿 CAS號: 145572447 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

絡塞定 CAS號: 100462371 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

絡緦 CAS號: 85026557 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

絡塞維 CAS號: 84954927 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

絡塞琳 CAS號: 84954938 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

紅景天苷 CAS號: 10338519 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

黃楊堿 CAS號: 860797 規(guī)格: 滴定法≥99%;20mg 訂購|咨詢

香 CAS號: 97530 規(guī)格: HPLC≥98%;0.5ml 訂購|咨詢

黃芪皂苷III CAS號: 84687423 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。

 

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