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ARTICLES細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
產品名稱:小鼠腸平滑肌細胞*培養基
規格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10263
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養基;優質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
IFN- Alpha ELISA Kit 大鼠α干擾素Multi-class antibodies規格: 48T
VAMP-3 囊泡相關膜蛋白3抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GATA-4 GATA結合蛋白4抗體 規格 0.1ml
HK ELISA Kit 大鼠己糖激酶 96T
Phospho-NMDAR2B (Tyr1474) 英文名稱: 磷酸化谷酸受體2B抗體 0.1ml
Adropin 英文名稱: 能量平衡相關蛋白抗體 0.2ml
VAMP-3 囊泡相關膜蛋白3抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Human Ku-antibody ELISA Kit 人抗Ku抗體Multi-class antibodies規格: 48T
IL-17RB 白介素-17B受體抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LXR alpha 肝臟X受體抗體 規格 0.1ml
Beta-OHB(Human Beta-Hydroxybutyric Acid) ELISA Kit 人β羥丁酸 96T
RSPO1 英文名稱: 分泌性蛋白RSPO1抗體 0.2ml
Connexin-32 英文名稱: 間隙連接蛋白32抗體 0.1ml
IL-17RB 白介素-17B受體抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Mouse rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml
GAK protein 英文名稱: 細胞周期蛋白G相關激酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh 5-HT 5-羥色胺抗體 規格 0.1ml
Phospho-Mre11 (Ser676)/FITC 熒光素標記磷酸化DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PTEN/MMAC1(CT) 一種抑制基因抗體(C端) 規格 0.1ml
Beta-Actin/HRP 辣根過氧化物酶標記β-肌動蛋白(抗體)Multi-class antibodies規格: 0.2ml
小鼠腸平滑肌細胞*培養基BJ51831毫升
BJ5183鈣轉感受態5 X 100微升對甲
BJ5183電轉感受態5 X 100微升二正辛
BJ5183-AD-1鈣轉感受態100微升水楊酰
BJ5183-AD-1電轉感受態100微升甲-4-磺酰
新戊二醇
質粒抽提試劑專題三乙二醇
4-硝基
名稱規格二基
大量質粒DNA氯化銫純化試劑盒10次茴香醛
煮沸法質粒/柯斯質粒DNA快速抽提試劑盒20次氯化兩面針堿
小量質粒抽提試劑盒20/50/100次異鼠李素
低內小量質粒抽提試劑盒20/50次反二酸(富馬酸)
無內小量質粒抽提試劑盒20/50次麝香
酵母細胞質粒提取試劑盒20次
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