公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：丙酮酸脫氫酶磷酸酶2(PDP2)重組蛋白   

物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase 2 (PDP2)

PPM2C2; PDPC 2; Protein Phosphatase 2C,Magnesium-Dependent,Catalytic Subunit 2; [Pyruvate dehydrogenase [acetyl-transferring]]-phosphatase 2, mitochondrial

酶與激酶

相關(guān)產(chǎn)品：
酸性葡糖苷酶α(GaA)重組蛋白英文名稱：Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)Homo sapiens (Human，人)

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白英文名稱：Active Acid Sphingomyelinase (ASM)Mus musculus (Mouse，小鼠)

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)真核蛋白英文名稱：Eukaryotic Acid Sphingomyelinase (ASM)Mus musculus (Mouse，小鼠)

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白英文名稱：Recombinant Acid Sphingomyelinase (ASM)Homo sapiens (Human，人)

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試，條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測(cè)和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)

　　誘導(dǎo)表達(dá)成功后，表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。

1、樣品前處理：

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管，然后再裂解。

c)對(duì)于組織樣品： 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點(diǎn)：

標(biāo)記：標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記：酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時(shí)可見(jiàn)、敏感性高。

熒光標(biāo)記：熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

ATPIF1產(chǎn)品名稱: ATPIF1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit

GEM產(chǎn)品名稱: GTP結(jié)合絲裂原誘導(dǎo)T細(xì)胞蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

G6PDH產(chǎn)品名稱: 己糖6磷suan脫氫mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit

CYB5D1產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞色suB5結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep

EDG8產(chǎn)品名稱: 內(nèi)皮細(xì)胞分化G蛋白偶聯(lián)受體8抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig

Calumenin產(chǎn)品名稱: 鈣腔蛋白單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

ZNF77產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白77抗體交叉反應(yīng): Human, Horse

DNAH10產(chǎn)品名稱: 軸絲動(dòng)力蛋白10抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow

Acetyl-Histone H3 (Lys36)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來(lái)源: Rabbit

EDIL3產(chǎn)品名稱: 表皮生長(zhǎng)因子樣重復(fù)折疊1結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
丙酮酸脫氫酶磷酸酶2(PDP2)重組蛋白人Y-染色體胸腺suβ4(Tβ4Y)ELISA試劑盒Tβ4YY-染色體胸腺suβ4elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Thymosin Beta 4, Y-Chromosomal(Tb4Y)ELISA Kit

人YY肽3(PYY3)ELISA試劑盒PYY3YY肽3elisa檢測(cè)試劑盒Human Peptide YY 3(PYY3)ELISA Kit

人YY肽2(PYY2)ELISA試劑盒PYY2YY肽2elisa kitHuman Peptide YY 2(PYY2)ELISA Kit

人YY1轉(zhuǎn)錄因子(YY1)ELISA試劑盒YY1YY1轉(zhuǎn)錄因子ELISA試劑盒Human YY1 Transcription Factor(YY1)ELISA Kit

人YbeY金屬肽mei(YBEY)ELISA試劑盒YBEYYbeY金屬肽meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human YbeY Metallopeptidase(YBEY)ELISA Kit